肉的宰后嫩化核心归因于肌原棉食物食物纤维构成的被破坏，肌原棉食物食物纤维构成是由内源性球蛋清酶淀粉蛋白酶质水解酶分解肌原棉食物食物纤维和癌受损癌神经细胞膜骨架球蛋清酶会造成的。与十多年来很久是喜爱焦聚的钙球蛋清酶酶各种，胱天球蛋清酶酶（caspases）这两天作为感业余爱好话题。胱天球蛋清酶酶在癌受损癌神经细胞膜凋亡的进行的阶段起着至关为重要的目的，至少caspase-3在人死了球蛋清酶淀粉蛋白酶质水解中的目的是各种面和很复杂的，这样值得买进步骤科研。S-亚硝基化经由调试钙放出、能量消耗消化吸收、球蛋清酶质分解和癌受损癌神经细胞膜凋亡来调试吃起来，比如嫩度和持水能力素质。前期工作科研表明S-亚硝基化能变动忽略线粒体的caspase-3级联的反应，这可能会是全身肌肉癌受损癌神经细胞膜凋亡和牛肉片好品质变迁的病因。caspase-3的科研关键性是其与癌受损癌神经细胞膜凋亡的社会关系，当然，比较少的有科研试论S-亚硝基化调试caspase-3的策略。

2024年9月由扬州农产品加工综合大学张万刚先生技术团队在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生物学为该研究提供了亚硝基化呈现组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文名字版头：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

刊物：Journal of Agricultural and Food Chemistry

202几年关系要素：5.7

文章发表时：2024年9月

买家公司：南京农业大学

探讨材料：蛋白

拜谱能提供技术水平：亚硝基化修饰组学

技術路线规划：

一、科学研究导致

01.Caspase-3特异性

现在尚不模糊NO对caspase-3的遏加工制角色是归因于NO介导的S-亚硝基化，的不同浓度值等度的GSNO作为一个外源性NO厂家直销，以诱发caspase-3的身体外S-亚硝基化。結果证明，与不会有GSNO的组相对于，100、200和400μM GSNO组的caspase-3催化活性氧不错减低（图1），与原本报导相符。GSNO治疗减低caspase-3催化活性氧的隐藏其原因仍尚待阐述。

图1 与众不同盐浓度的GSNO处置对caspase-3抗逆性的不良影响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化的程度

探寻方案探讨Caspase-3的亚硝基化地步，以体现了GSNO对Caspase-3的现象性。经GSNO净化处理后，检侧到caspase-3蛋白酶S-亚硝基化承载力增多（图2）。等等最后体现了，外源性GSNO培训可非常成功帮助caspase-3的身体S-亚硝基化。令人感动特别的是，在无GSNO会存在的对应组中检侧到一薄弱的S-亚硝基化带，这体现了caspase-3很有可能引发内源性的S-亚硝基化。不仅，本探寻方案探讨中caspase-3的S-亚硝基化地步较高，而caspase-3的活性氧降底，这与前面的探寻方案探讨同一。尽管，caspase-3的炎症因子朋友S-亚硝基化突显位点尚不知晓，还要有进十步的探寻。

图2 GSNO工作对caspase-3S-亚硝基化水平方向的的影响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化突显组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的回文回文序列。深蓝色图标的回文回文序列说道法S-亚硝基化肽，红颜色图标的C说道法S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱分析

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3生物降解结蛋白酶

结淀粉酶当作其中一种关键性的体受损细胞骨架淀粉酶，在确保肌体受损细胞组成部分的组成部分保密性性和内缩性方向起着关键性用处，论述S-亚硝基化caspase-3对结淀粉酶溶解的皮肤敏情绪化含有关键性意义上。与Std（未用胱天淀粉酶酶-3和GSNO孵育的开始肌化学纤维棉淀粉酶）组相比较，0 μM GSNO组（肌原化学纤维棉和caspase-3的孵育，无GSNO）的保密性结淀粉酶硫成分相关性减低，警告caspase-3对结淀粉酶含有不确定的淀粉酶电离程度。在GSNO孵育后，保密性结淀粉酶的硫成分明星加大（P < 0.05）。凡此种种，当GSNO渗透压身高时，保密性结淀粉酶的硫成分长期上浮（P < 0.05）（图5）。这个感觉阐明，SNO表达的caspase-3以程度忽略的途径抑止结淀粉酶的溶解。

图5.S-亚硝基化caspase-3降解塑料结血清

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3吸附肌钙淀粉酶-T

肌钙血清酶-T (TnT)是原肌球血清酶调试负责管理腿部肌肉膨胀的细条的一定要肌原仟维棉血清酶。TnT的可挥发特性是查测到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化标准下，caspase-3对TnT的可挥发具体情况如图一样6一样，与Std组（不包括caspase-3和GSNO的肌原仟维棉）相对比，caspase-3组中30 kDa TnT场面描写更为凸显增高，得出结论caspase-3组织了TnT的可挥发，最后，caspase-3与GSNO的孵育会造成的30 kDa TnT下调。在100和200 μM GSNO组之前找不到查测到凸显的之间的关系(P > 0.05)，而当GSNO的质量浓度达到400 μM 时，该场面描写更为凸显才能减少(P < 0.05)。这个找到得出结论了SNO绘制的caspase-3对TnT可挥发的治理和改善效用。结血清酶和TnT是caspase-3的刺激性底物，而GSNO办理变低caspase-3的亲水性几率会造成的肌原仟维棉血清酶可挥发系数变低。笔者认为上述，NO诱导性的S-亚硝基化可以借助绘制半胱氨酸残基来调试caspase-3的亲水性，以求进那步影响到到其对结血清酶和TnT的血清酶淀粉水解性能，可以影响到到羊肉品质质量。

图6. S-亚硝基化caspase- 3生物降解肌钙蛋清-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、个人总结

本设计亟需探究S-亚硝基化对caspase-3遮盖的的决定十分随着对牛羊肉肌原玻璃合成纤维身体光降解的的决定。核核蛋白酶S-亚硝基化能否遮盖caspase-3的半胱氨酸残基，才能诱发caspase-3几丁质酶变低，进一点克制了其对牛羊肉肌原玻璃合成纤维核核蛋白酶的核核蛋白酶油脂水解作用。

三、拜谱工作小结

科学实验所采用了酶活测量，亚硝基化淡化组学定性分析，WB等查测机制化，发现了核血清酶S-亚硝基化会淡化caspase-3的半胱氨酸残基，这影响了caspase-3生物的较低，并举步骤克制了其对牛羊肉肌原棉纤维核血清酶的核血清酶溶解意识。本科学实验为说明核血清酶质亚硝基化对肉质地的调整机制化可以提供好几回个新的的视角。

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考虑论文毕业论文：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663