冷胁迫是直接影响农经济作物收获量的主要的室内环境试练一个。钙依耐性蛋白酶激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）数据传播到細胞并激话对逆境中成长相应的核心缓解指数，但其调整工作机制尚不很清楚。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷碱化表达位点加测服务。

英文怎么说网站标题：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

繁体中文宝贝标题：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

投资者企事业单位：浙江大学

理论研究资料：番茄

拜谱提供了水平：磷碱化突显位点的检测

调查设想：

一、研究方案没想到

1、CPK27在高温胁迫下展现调整，得以强化主茎耐寒性性

继往分享说明，CPK27在冷胁迫必备条件下呈现上涨。为确认这个可是，文章中做者利用CPK27的两大敲除突然变化系（cpk27 #2，#6）使用耐旱性测验，发觉CPK27的转录水准不错不低于参考组（图1a-b）。在CPK27呈现被促使的绿植中，对耐旱性的改善目的不错削弱。进那步的亚受损细胞系品牌定位与促活分享说明，冷胁迫促进会CPK27向受损细胞系核积累作文，并改善其磷碱化水准（图1 f）。免疫细胞印记分享进那步得知冷胁迫诱导型 CPK27 在核内蛋清丰度曾加、胞内丰度限制，外源CaCl₂加工处理可大部分医治cpk27的冷强烈表型，说明CPK27依赖症Ca²⁺卫星信号发挥出目的。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺依赖症方案提升番茄耐热性

2、CPK27进行改善黄胺类镶嵌经过可以低温环境伤到

转录组测序结果显示 显示 ，CPK27的过把你想表达出来出来不错上浮黄胺类生物体制作而成相应人类人类基因，如CHS、CHI和FLS等，同一黄胺类消化吸收通道不错丰度。而CPK27突变性体中这样人类人类基因把你想表达出来出来调低，显示CPK27用使得黄胺类制作而成促进植物体减缓温度低胁迫引来的脱色的压力（图2a-e）。

图2 RNA-seq研究CPK27自我调节的冷加载失败表观遗传

3、HY5是CPK27介导的抗寒网络信号信号通路中的重要靶标

为查验 CPK27 与 HY5 的主动效果，作著一开始确定了酒曲双混种（Y2H）试验，但是证明这两种具备主动效果（图3a）。双分子式荧光相容（BiFC）试验进的一步是因为CPK27 与 HY5 在神经细胞质内形成主动效果（图 3b）。那么进行免疫检测共沉定等技巧，会发现HY5与CPK27在常绿植物机体具备主动效果，且这两种的主动效果还具有钙化合物（Ca²⁺）依赖于性（图 3c）。还有，在Co-IP试验的球蛋白导出前施用冷胁迫治疗，但是提示冷胁迫可改善HY5与CPK27的主动效果（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷酸性反应其至关重要位点

4、CPK27磷硝化作用HY5不断增强其转录灵活性，使得黄吩噻嗪染色体表答

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷碱化突显位点探测，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷碱化HY5并减弱其增强性

5、CPK27 在类黄酮怪物合成视频通道中做用于HY5的中上游

总体什么是基因把你想表达出来和分解物进行分析结局（图5），CPK27在冷胁迫初始化失败的时候中功用于HY5的上中下游，用管控 HY5 介导的类黄酮生物制品合并径路影晌草本花卉耐低温性。

图5 CPK27的功效于HY5上下游

二、经典文章工作小结

总而言之所讲，这段话理论研发表面CPK27磷过酸遮盖HY5蛋白酶，修改密码类黄酮合成图片渠道，激发抗空气氧化物品积累作文，而能强化抗寒意识。该理论研发揭示了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联调节管控工作机制（图6），印证CPK27介导的HY5磷过酸是连接方式钙数据与次生分解代谢阻碍的要点的环节，为定义绿植面对困境为了响应网上提高了新第一视角。

图6 CPK27-HY5控制模块的提升绿植的受冷胁迫的考核机制

三、拜谱个人总结

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清质组学、绘制血清质组学、新陈代谢组学、转录组学等几组学护肤品技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

决定性期刊论文：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134